常见的细胞核染料有Ethidium Homodimer-1(溴乙啡锭二聚体1)、hochest染料、DAPI、PI等。一起来看看这几种染料的应用吧~
1.Ethidium Homodimer-1 (EthD-1),荧光颜色:红色;染细胞类型:死细胞;应用:
(1)Ethidium Homodimer-1是一种高亲和性的荧光核酸染料,与DNA或RNA结合后,可以使荧光增强30多倍。
(2)由于带有较强正电荷,所以该染料不能穿过细胞膜进行活细胞染色,但是可以准确的检测溶液中的核酸或者解体细胞中的核酸,是一种较灵敏的核酸染色剂。
(3)此外EthD-1可与钙黄绿素AM联合使用,分别染色死细胞和活细胞,从而判断细胞活力和毒性。
2.Hoechst 33258&Hoechst 33342,荧光颜色:蓝色;染细胞类型:活细胞(主要是早期调亡细胞);应用:
(1)Hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色,该染料在染细胞核时会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。
(2)Hoechst染料在细胞周期和凋亡(早期凋亡)研究中被广泛应用,也被广泛应用于核复染色,有Hoechst 33258和Hoechst 33342两种。
(3)Hoechst 33258在活细胞中DNA的AT序列富集区域的小沟处与DNA结合,广泛用于细胞凋亡检测,染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。两者区别不大,但是Hoechst 33342对细胞的毒性作用更小一些,因此一般Hoechsts 33258用于细胞固定后再染色,而Hoechst 33342则可以对活细胞直接进行染色。
除此之外,碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)也是一种常见的细胞核染色染料,以下简称“PI”。
3.DAPI,荧光颜色:蓝色;染细胞类型:活细胞和固定细胞;应用:
(1)DAPI是一种常用的可以穿透细胞膜蓝色荧光DNA染料,可对DNA 染色的细胞核染色试剂,其与DNA结合后可以产生比DAPI 自身强20多倍的荧光,而与单链DNA结合无荧光的增强。
(2)DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高于EB和PI,荧光强度比Hoechst低,但光稳定性高于Hoechst。部分重垂,研究员可以替用这项特性在单-的样品上进行多重荧光染色。
(3)DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为-种毒性物质与致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。
使用PI单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色)。但是如果我们只是想知道细胞的死亡情况,而不是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色即可以。但是如果我们一定要认定细胞的凋亡,那么PI单一染色显然不够!这个时候使用Abbkine的细胞状态检测系列产品,例如,TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(细胞凋亡晚期),Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒和线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1)(细胞凋亡早期)以及Caspase系列活性分析试剂盒(比色法)(细胞凋亡中期)。
文章来源:
染细胞吗?核酸染料注意查收
http://www.abbkine.cn/nucleic-acid-dye
「艾尔登法环」梅琳娜手办开订 立体手办▪
万代「艾尔登法环」白狼战鬼手办开订 立体手办▪
「夏目友人帐」猫咪老师粘土人开订 立体手办▪
「五等分的新娘∬」中野三玖·白无垢版手办开订 立体手办▪
「海贼王」乌索普Q版手办开订 立体手办▪
良笑社「初音未来」新手办开订 立体手办▪
「黑岩射手DAWN FALL」死亡主宰手办开订 立体手办▪
「盾之勇者成名录」菲洛手办登场 立体手办▪
「魔法少女小圆」美树沙耶香手办开订 立体手办▪
「咒术回战」七海建人粘土人登场 立体手办▪
「五等分的新娘」中野二乃白无垢手办开订 立体手办▪
「为美好的世界献上祝福!」芸芸粘土人开订 立体手办▪
「公主连结 与你重逢」六星可可萝手办开订 立体手办▪
「女神异闻录5」Joker雨宫莲手办开订 立体手办▪
「间谍过家家」约尔・福杰粘土人登场 立体手办▪
「街角魔族 2丁目」吉田优子手办开订 立体手办▪
「火影忍者 疾风传」旗木卡卡西·暗部版粘土人登场 立体手办▪
「佐佐木与宫野」宫野由美粘土人开订 立体手办▪
「盾之勇者成名录」第2季拉芙塔莉雅手办开订 立体手办▪
「咒术回战」两面宿傩Q版坐姿手办开订 立体手办▪
「DATE·A·BULLET」时崎狂三手办开订 立体手办▪
「狂赌之渊××」早乙女芽亚里粘土人开订 立体手办▪
「魔道祖师」魏无羨粘土人开订 立体手办▪
「新·奥特曼」奥特曼手办现已开订 立体手办▪