Cayman Chemical：人类雌激素相关受体β报告物测定系统

Cayman Chemical 人类雌激素相关受体β报告物测定系统（37049）背景：

INDIGO雌激素相关受体测定利用专有的人类哺乳动物细胞，该细胞被设计为提供人类雌激素相关受体β（NR3B2）杂交形式的高水平表达。

该雌激素相关受体β（ERRβ）测定试剂盒是一种全方位萤火虫荧光素酶报告物测定系统，除ERRβ报告细胞外，还包括两种用于细胞培养和稀释用户测试样品的优化培养基，参考反向激动剂4-羟基他莫昔芬，用于制备荧光素素酶检测试剂的试剂，以及详细的协议。

ERRβ报告细胞使用INDIGO的专有CryoMite制备™ 过程这种冷冻保存方法在解冻后产生高细胞活力，并提供了立即将健康、分裂合格的报告细胞分配到测定板中的便利。不需要中间的旋转和洗涤步骤、活力测定或细胞滴度调整。

图：人ERRβ的剂量反应分析。ERRβ报告细胞用不同浓度的A处理。激动剂GSK4716和DY131（Tocris）和B.反向激动剂4-羟基他莫昔芬（提供）。平均相对光单位（RLU）及其对应值分别测定了标准偏差和变异系数百分比处理浓度（n=3）。折叠激活值（F/A）和折叠减少值（F/R）

在ERR中，β活性是通过标准化测试中相应的RLU值来计算的化合物处理过的报告细胞的RLU值与未处理的报告细胞相比。Z’值按照Zhang等人（1999）的描述计算.非线性回归和

使用GraphPad Prism软件进行相应的EC50和IC50测定。

Cayman Chemical 艾美捷该组件和储存条件：

此人类ERRβ检测试剂盒包含执行三组不同检测的材料以96孔板格式。试剂的配置使得每组包含32个分析。然而，如果需要，可以组合试剂以进行64或96次测定。报告细胞对温度敏感！为了确保细胞管的最大活力必须保持在-80°C，直到快速解冻程序之前。

化验试剂盒在干冰上运输。收到后将其转移至-80°C的仓库。如果您希望首先检查和清点各个套件组件，确保首先转移并将报告细胞管浸入干冰中。报告细胞的等分试样作为一次性试剂提供。解冻后，细胞不能再冷冻，也不能在长期培养中保持保持下游测定性能。因此，这些试剂的额外体积应在化验设置后丢弃。

Cayman Chemical 该组件试验化合物的制备：

小分子测试化合物通常以高浓度溶剂化在DMSO中；理想情况下，1000倍的浓缩原液相对于测定。使用高浓度贮存物可最大限度地减少DMSO带入分析盘子。在建立分析之前，使用两种备选策略之一：

1.）化合物筛选介质（CSM）可用作稀释剂，进行连续稀释以获得所需的最终测定浓度系列。

2.）DMSO可用于连续稀释，从而产生1000倍的浓缩每个独立测试浓度的储备。然后使用

CSM对制备的DMSO稀释系列进行最终1000倍稀释。无论使用何种稀释方法，携带的DMSO总量的最终浓度进入分析孔的浓度不应超过0.4%，预计高于0.4%。

注：CSM的配制有助于稳定测定混合物的水环境。尽管如此在CSM中稀释的极疏水性测试化合物可能缺乏长期特别是如果进一步在低温下储存。因此，它建议立即在CSM中制备测试化合物稀释液并且被认为是“一次性”试剂。

Cayman Chemical涉及癌症、肿瘤、氧化损伤、凋亡、氧化性损伤、代谢、内分泌学等多种研究领域。艾美捷科技是Cayman Chemical的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。